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肺炎支原体IgM抗体检测的常用方法比较(2)

时间:2013-09-30 20:48来源:幸福检验网 收集整理 点击:
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随着临床诊断技术的不断发展,证实肺炎支原体是呼吸道及其他器官感染的重要病因之一,发病率日益增加并有流行趋势,临床重症病例和肺外并发症常有发生,MP的临床表现、X线征象均缺乏特异性,且须与病毒性肺炎、军团菌肺炎相鉴别,只能通过实验室检查病原体分离阳性和血清学试验进行鉴别诊断、确诊。血清中特异性抗体可通过冷凝集试验(CAT)、间接血凝试验(IHA)、明胶颗粒凝集实验(PLA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、金标免疫斑点法(DIM)等方法进行测定。
 
冷凝集试验(CAT)是根据支原体患者血清中有一种抗红细胞I抗原的抗体称红细胞凝集素,能与自身或“O”型人的红细胞在0℃~40℃条件下发生凝集反应,37℃时已凝集的红细胞呈可逆性完全分开。发病后2周,约半数病例产生抗体,红细胞冷凝集试验阳性,滴定效价在1:32以上,恢复期效价4倍增加的意义大。但MPP轻症阳性率只有30%左右,且50%左右正常人血清中有冷凝集素,只是小于1:10,有时大叶性肺炎也呈阳性反应,尤其是当患有下列疾病时,冷凝集试验亦有较高效价的阳性反应:流行性感冒、传染性单核细胞增高症、锥虫病、肝硬化、黑水热、重症贫血、骨髓瘤、热带性嗜酸粒细胞增高症、腮腺炎并发睾丸炎、疟疾、螺旋体病等。因CAT特异度和敏感度均为最低,因此其临床诊断价值不大。
 
间接红细胞凝集反应(IHA)一般用绵羊红细胞以单宁酸处理,再以MP抗原使之结合,如加上抗体则可见红细胞凝集反应,其抗原效价为32倍左右。统计学处理表明间接血凝试验在临床应用中仍具有较高使用价值。灵敏度、误诊率、阴性预测值较高,而特异度、漏诊率、阳性预测值较低,且价格低廉,适合于发现病例。 
 
富士明胶颗粒凝集法(PLA)是将肺炎支原体(株)细胞膜成分致敏人工明胶颗粒,致敏粒子再与人血清中存在的肺炎支原体抗体发生凝集反应。操作简单、迅速,并尽可能消除红细胞载体引起的非特异性凝集,凝集图像清晰,过夜后再判读不发生显著变化,灵敏度1:320左右,特异性强,重复性好,适合于早期诊断。
 
金标免疫斑点法(DIM)是根据金标免疫渗滤原理,利用MP抗原采用免疫渗滤技术,检测MP抗体,黄疸、溶血无影响,分泌物、粪便标本加生理盐水离心取上清可以检测。但是敏感度略低,有漏诊的可能;阳性拟然比最高,而且操作简单快速,是确诊MPP的最好方法。
 
酶联免疫吸附法(ELISA)是Engvall等于1971提出的,此法具有特异、敏感和简便等优点,已用于检查各种抗体或抗原。Franco等于1980年使用此技术检测可疑支原体肺炎病人血清中的特异性抗体,并获得了满意结果。国内有人以超声波粉碎的肺炎支原体菌液为抗原,用ELISA间接法对病人、接触者及健康人和血清做了研究。近年来,采用μ-链捕获ELISA检测肺炎支原体特异抗体IgM,在发病1周内即可检出。该方法的敏感度、特异度、准确度、阳性预测值、阴性预测值、阳性拟然比和阴性拟然比均较好,适合临床常规使用。
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