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【关键词】  全自动加样系统;酶联免疫吸附测定;拖带现象;设备污染

　全自动加样系统在血站的使用日趋普及，但目前使用的多为固定加样针，这样分配位置　　在前的样本会使其后的样本出现不同程度的污染，引起假阳性或假阴性，也就是通常所说的　　拖带现象。拖带现象会导致大量标本待检或试验重做，这样不但增加了工作量，浪费试剂，　　更为严重的是有可能导致阳性标本的漏检，影响检验质量。现将本站43 242份标本的检测情　　况作回顾性分析，以寻求有效的解决拖带现象的方法。

　　1材料与方法

　　1.1标本来源43 242份标本均为本站无偿献血者现场留样抗凝标本。

　　1.2拖带现象的识别通常做酶免实验的96孔微板8行以A～H标示、12列以1～12标示。根据全自动加样系统的分配规律，运行方向是以微板从左到右，即从第1列开始，每次加8孔。ML-STAR有三组钢针，每组8根针，通过循环轮换三组钢针模式实现样本的批处理;Freedom EVO Clinical 200只有一组8根钢针。如果阳性(特别是强阳性)标本后经同一根针所加标本出现一个或多个连续阳性，比如用ML-STAR加样，如果A1阳性，A4或后面每隔2孔也是阳性;若是用Freedom EVO Clinical 200加样，如果A1是阳性，A2或后面的板孔也是阳性，且越往后反应强度越弱则怀疑是拖带所致。

　　1.3仪器与试剂Freedom EVO Clinical 200全自动加样系统(瑞士TECAN)、ML-STAR全自动加样系统(瑞士HAMILTON);HBsAg试剂盒由厦门新创和北京万泰提供，抗-HCV试剂盒由北京万泰和北京金豪提供，抗-HIV试剂盒由珠海丽珠和北京金豪提供，TP抗体检测试剂盒由北京万泰和厦门新创提供。

　　1.4实验方法按照试剂说明书要求编制加样程序，初、复检四项的加样顺序为HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、TP，先加初检，后加复检，最后加对照。对疑似拖带现象导致假阳性　　的标本挑出原试管和小辫进行复检，经手工加样双孔复试为阴性则证实为拖带所致的假阳性。

　　2结果

　　本组43 242份标本中因拖带现象引起的假阳性结果，见表1。表1拖带现象导致的假阳性结果有报道[1]称污染现象与实验中加样程序的先后顺序有关，TP加样顺序在后，所以出现前排孔阳性污染后排孔的现象以TP多见。本组结果显示，造成拖带现象最严重的是抗-HIV，抗-HCV和TP也常见。而HBsAg采血前虽经金标试剂筛查，仍有不少漏检，其中不乏HBsAg强阳性者，但因拖带导致HBsAg假阳性则罕见，是与检测试剂的灵敏度有关，还是因为绝大多数献血者血液中含有抗-HBs所致，或者是别的原因，值得进一步探讨。笔者通过观察发现，阳性反应越强拖带越严重，抗-HIV最多连续拖带达8孔，同时发现同一项目不同厂家的试剂拖带程度不同，这可能也跟检测试剂的灵敏度有关。另外一个有趣的现象是，因抗-HIV阳性而造成后面拖带的百分之百都是HIV确证阳性，而抗-HIV假阳性哪怕反应有多强都不会引起拖带现象。

　　3讨论

　　对于全自动加样系统所出现的拖带现象，有报道用改变冲洗方式[2]或定期用HCl和NaOH冲洗和浸泡加样器的管道等方法来解决[3]，但笔者认为最好的解决办法是使用一次性加样针，这才是最根本的解决办法。在没有改用一次性加样针的情况下，遇到拖带现象则应将被污染的标本重新取样进行再检，以避免假阳性的产生，而因拖带所致的HBsAg假阴性则难以避免，因为如果拖带抗-HBs会中和HBsAg。现在有的血站利用全自动加样系统进行同步留样保存标本[4]，如果用的还是固定加样针，肯定会造成样本之间的交叉污染，这样的留样就会失去其意义，所以说使用一次加样针是势在必行。实践证明本站最近Freedom EVO Clinical 200全自动加样系统采用一次性加样针已无拖带现象出现。

作者：李荣    作者单位：(广西玉林市中心血站，广西 玉林)

 

【参考文献】

  　　[1]孙振秀,于仁波,马秀敏.对加样针致高滴度阳性标本污染酶标板后孔的观察[J].中国输血杂志,2005,18(1):46-47.

 

　　[2]段友斌,寸伟,裘俊梅,等.全自动加样系统抗-HIV阳性样本拖带现象对试验的影响及解决方案[J].中国输血杂志,2007,20(5):385-386.

 

　　[3]修淑丽,李燕,吴硕,等.阳性拖带现象产生的原因和解决方法[J].中国输血杂志,2006,19(3):218-219.

 

　　[4]潘海平,吴玉清,赵林.应用全自动加样仪留取血样的探讨[J].中国输血杂志,2007,20(2):142-143.