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应用FQ-PCR方法检测单纯疱疹病毒Ⅱ型DNA的研究

时间:2011-01-07 18:52来源:幸福检验 整理 点击:

 【摘要】  目的:了解广东省深圳市某区人群单纯疱疹病毒II型(HSVⅡ)的感染状况。方法:采用荧光定量聚合酶链反应(FQPCR)技术测定HSVⅡ DNA。结果:性传播疾病(性病)患者的HSVⅡDNA阳性检出率:35.34%( 464/1 313);正常对照组的HSVII DNA检出率:12.20%(15/123) 两组的HSVⅡ DNA检出率,患者组明显高于对照组(P<0.01)。结论:不同人群HSV的感染状况不同,正常人群中存在HSVⅡ感染,HSVⅡ是性病的重要病原体之一。

【关键词】  单纯疱疹病毒2型 DNA 荧光定量聚合酶链反应
  
    生殖器疱疹(GH)是由单纯疱疹病毒( herps simpux virus,HSV)感染导致的性传播疾病之一,HSV为人类易感病毒之一,在经济不发达的社会有较高的感染率;由于病毒感染后具有潜伏、发病及复发的复杂性,因而在病毒性疾病的流行病学研究及临床的诊治上倍受关注其中的单纯疱疹病毒2型(HSVⅡ)主要感染腰部以下部位,在性传播疾病中占有重要的位置[1];其临床表现多种多样,典型的生殖器疱疹可表现为特征性的集簇性水疱、溃疡,但不典型、亚临床无症状感染也相当多见[2]。为了解本地区人群中HSVⅡ的感染状况,我们收集了部分人群分泌物做了HSVⅡ DNA的检测现报告如下。
  1  资料和方法
  1.1  研究对象 
  从2005年4月至2008年1月来深圳市宝安区西乡人民医院我院皮肤科门诊就诊,拟诊为GH的分泌物标本1 313份,其中男性1 003份,女性310份,年龄21岁~68岁,同期收集健康体检者分泌物123份作为对照组,其中男性63份,女性60份,年龄21岁~68岁。
  1.2  标本采集
  1.2.1  男性患者 
  将无菌拭子插入尿道口内2 cm~4 cm处,旋转3 s~5 s后取出,将取样后的拭子放入无菌试管中送检。
  1.2.2  女性患者 
  在取样前先用另外的拭子或棉球将宫颈口外的黏液或分泌物擦去,再将取样拭子插入宫颈管内1 cm处,旋转15 s~20 s后取出,将取样后的拭子放入无菌试管中送检。
  1.2.3  标本采集后尽快送检。
  1.3  试剂、仪器、操作 
  HSVⅡ的检测采用实时荧光定量PCR技术,检测试剂盒购于深圳匹基科技有限公司,试剂盒的测定范围为102copies/ml~1012copies/ml,灵敏度为5.0×102copies/ml,仪器采用美国MJR Option(2)实时荧光仪,严格按照说明书进行操作及判定结果。
  1.4  统计学分析 
  用卡方分析进行统计学处理。
  2  结果
    性病患者和对照组的HSVⅡ DNA的阳性率测定,结果见表1,两组结果均有统计学意义(P<0.01),其中性病患者的HSVⅡ DNA阳性率显示明显增高。表1  患者组与对照组的HSVⅡ DNA测定结果(略)注:△与▲有统计学意义(P<0.01)。
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