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ELISA检测中HBeAg和抗-HBe双阳性原因分析

时间:2010-11-14 13:06来源:幸福检验 整理 点击:

  【摘要】 目的  分析HBeAg和抗-HBe双阳性的原因。 方法  初筛试验用一步法检测。复核试验HBeAg仍用一步法和微粒子酶免分析法,抗-HBe用二步法和微粒子酶免分析法。 结果  63份HBeAg和抗-HBe双阳性标本经复核:18份HBeAg阴性,45份抗-HBe阴性。 结论  “e”系统双阳多为操作误差和一步法造成,必需进行复核。

 
  关键词  乙型肝炎病毒 酶免检测 复核
       
  乙型肝炎病毒HBeAg阳性,表明病毒复制活跃、传染性强,与HBsAg同时阳性发生肝癌的危险系数增加60倍,抗-HBe阳性说明病毒复制减少,传染性弱。近年来,普遍使用ELISA一步法,在工作中遇到HBeAg和抗-HBe双阳性的少见模式,为了分析这一现象,笔者进行了研究,现报告如下。www.xf366.com
     
  1 材料与方法
     
  1.1 标本来源 本院门诊和住院患者1910例,其中63例初筛模式为HBsAg、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc4项阳性。
  
  1.2 试剂和仪器 (1)ELISA试剂盒、HBeAg和抗-HBe为上海科华生物技术有限公司产品,批号分别为:20040316、20040516,酶标仪MK-2型、洗板机均为芬兰雷索公司产品。HBeAg样品吸光度值/临界值(S/N)≥2.1判阳性,抗-HBe以抑制率>50%判阳性。(2)微粒子酶免分析(MEIA),使用美国雅培公司试剂和美国AXSYM全自动酶免发光分析系统。抗-HBe采用竞争法,以样本荧光速率值与临界荧光速率值之比(S/N)≤1.0判阳性。
     
  1.3 方法 (1)初筛:一步法,严格按说明书操作,每加5份血清加入酶标抗体。分别检测HBeAg、抗-HBe。(2)复核:溶血标本重抽血,脂法患者禁脂3天后抽血;血块收缩不良,分离不完全标本,经3000r/min10~15min的离心。HBeAg用一步法和微粒子酶免分析。抗-HBe用改进二步法和微粒子酶免分析法,改进再二步法为先加入50μl血清37℃水浴30min,洗涤3次,加酶标抗体37℃水浴30min,再严格按说明书操作。
     
  2 结果
     
  初筛63份HBeAg和抗-HBe双阳血清。经复核:18份HBeAg阴性,抗-HBe仍阳性,45份抗-HBe阴性,HBeAg仍阳性。18份HBeAg阴性标本为溶血和分离不完全标本,初筛与复检吸光度(A值)比较明显下降,差异有非常显著性(P<0.001),见表1。45份抗-HBe复核阴性标本中,一步法与改进2步法吸光度(A值)比较,吸光度值上升,二者差异有非常显著性(P<0.001),见表2。
     
  表1 HBeAg初筛与复检吸光度值比较(略)
     
  表2 3种方法测定血清抗-HBe水平比较(略)
    
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