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血液检验室内质控存在的若干问题及其对策(2)

时间:2010-11-10 15:54来源:幸福检验 整理 点击:
 
6 显色
 
  严格按说明书控制显色时间、温度以免人为造成吸光度升降,而影响灰区结果,加终止液后及时比色。TMB被认为是ELISA反应中最佳色原底物,但终止15min后高浓度者易产生灰褐色絮状沉淀并伴黄色渐退吸光度下降,建议终止15min内及时比色 [4] 。
 
7 酶标仪性能评价与鉴定
 
  卫生部明确规定酶标试剂不得用目测法判结果,仪器和设备是搞好质控和日常工作的前提和保证。成军等 [5] 介绍了一套以490nm、甲基橙溶液为例的酶标仪的评价方法,内容包括滤光片波长、零点飘移、线性、精密度、通道差与孔间差等,具有较高的实用价值。经常维护其光学部分防止滤光片霉变、定期检测校正,使其保持良好的工作性能。
 
8 质控图的制作
 
  ELISA室内质控方法一般沿用生化L-J图进行,利用Westgard规则判定失控,应首先做好OCV和RCVK以确定失控标准,在实际工作中取得很好效果。“即刻法” [6] 质控只需连测3次即可对第3次进行质控,给基层单位带来了方便。但是其SDI设置是套用生化的手段,在免疫检测中是否适用尚无定论,同时L-J图不能判ELISA的特异性。鉴于ELISA试验目的在于检出抗原或抗体,因此要确保敏感性和特异性,故许斌 [7] 提出临界值血清界定法:试剂所设阴阳对照为内对照,另设临界值、高值阳性和2份正常人阴性对照,作为外对照与标本同时检测,临界值S/CO>1,高值阳性S/CO>10,正常人阴性对照A值在0.050~0.100,只要一项不符合即判为失控,其中临界值为敏感度监控、阴性对照为特异性监控、高值为“HOOK”监控,因此临界值血清界定既反映ELISA的灵敏度又兼顾特异性,实际工作中和质控图一起应用。
 
9 结论
 
  室内质控的目的在于能控制实验室每天的检测结果是否可靠,能否报告,是实验室管理的最基本措施。临界值血清做室内质控血清可防止弱阳性标本漏检,每次实验时随献血者标本加测,每板一孔如未失控证明实验可靠,原始记录保存可作因输血所致医疗纠纷的一个关键证据。实验过程中失控现象时有发生且以超过下限为多见,致临界值结果阴性,此点应引起特点重视,必须将失控板重做并找出原因,以确保报告准确性。由于开展了室内质控,工作人员责任心加强了,操作更规范,提高了实验检测的准确性,有效保证了血液的质量。
 
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