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【关键词】  血氨；方法学；光密度

 作者：刘福，曾芝兰 

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　　正常人体内游离血氨（blood ammonia，BA）含量极低（正常值20～60 μmol/L）［1］，其主要来源于体内蛋白质在代谢过程中产生的氨基酸，以及经脱氨作用分解而来的内源性氨，正常情况这种氨可形成酰胺及合成其他含氮化合物而不断地被转化；另一来源是蛋白质类食物在肠道内经细菌分解而成的外源性氨，正常情况下此氨经门静脉进入肝脏被合成为脲，经肾脏排出体外。然而在发生代谢障碍性疾病，如肝性昏迷、肝性脑病、重型肝炎、尿毒症等由于氨不能正常代谢排出体外而引起BA升高。肝功能极度衰竭或血液不能正常地流经肝脏转换等严重肝脏疾病，氨不能从循环中及时清除均可使血氨增高［1］。高BA有神经毒性，BA的测定对于肝硬化门脉高压、肝昏迷、Reve’s综合征及儿科的一些先天性代谢紊乱等病的诊断、观察和预后判断有着重要意义［2］。BA的测定方法有微量扩散法、比色法、离子交换法、氨电极法、酶法等。笔者在结合本实验室现有条件，参考国内外有关文献建立快速、准确的检测BA方法，为临床该类疾病的诊断、治疗提供参考。

　　1  仪器与试剂

　　1.1  仪器

    　　

　　电子天平 COBS120型（朝鲜COBS公司），紫外分光光度仪HP8453（美国惠普），离心沉淀器800型（上海手术仪器厂），YKHI型液体快速混匀器（江西医疗器械厂），DHW420三用电热恒温水箱（北京东霞科学仪器厂）。

　　1.2  试药

    　　

　　钨酸钠（天津市大茂化学试剂厂，批号030906），硫酸铵（重庆北碚化学试剂厂，批号050329），亚硝基铁氰化钠（上海三爱思试剂公司，批号20020204），苯酚（重庆北碚化学试剂厂，批号：20000924），氢氧化钠（重庆川江化学试剂厂，批号20000312），次氯酸钠（重庆川东化工集团化学试剂厂，批号20040904），硫酸铵（重庆北碚化学试剂厂，批号050329），硫酸（重庆川江化学试剂厂，批号20000105），所用试药均为分析纯，水为新制无氨蒸馏水。

　　2  方法与结果

　　2.1  储备溶液的配制［2］

    　　

　　无氨水的制备：参照文献［3］取重蒸水1 000 mL，加稀硫酸1 mL与高锰酸钾试液1 mL，蒸馏即得备用。

    　　

　　酚显色剂：精取亚硝基铁氰化钠25.00 mg，与适量苯酚混合后加无氨水至100 mL,过滤即得。

    　　

　　碱性次氯酸钠溶液：精取250 mg次氯酸钠，氢氧化钠2 500 mg，溶于100 mL无氨水中即得。

    　　

　　0.5 mol/L硫酸溶液、5 mmol/L硫酸铵溶液参照文献方法［3］配制。

　　2.2  标准溶液的配制

  　　

　　分别精取“2.1”项的硫酸铵储备液20、200、500、1 000、1 500、2 000、4 000 μL置于50 mL容量瓶，立即加无氨水至刻度即得10、20、50、100、150、200、400 μmol/L的硫酸铵系列标准溶液。