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ELISA方法做两对半，其中HBsAg、HBsAb、HBeAg使用双抗原/抗体夹心法检测，而HBcAb、HBeAb使用竞争抑制法检测。而竞争抑制法的原理：酶标抗体与样本抗体在同样的体系中，与固相抗原竞争结合是等比关系。理论上讲，应该先将样本与酶标抗体先行混匀，然后加入反应也进行。但实际工作中并非如此，都是分开加入反应孔。这样会造成先加入的先结合，与后加入者并不是公平的关系，因而也不符合等比原则。特别是在放置时间长，且温度高的情况下，对结果有很大的影响。 放置时间（min） 阴性标本数 临界值－标本A450nm值 假阳性率(%) <0.3 0.3~0.7 >0.7 0 75 10 3 6 0 2 68 13 7 6 7.4 5 65 15 8 6 10.6 10 56 16 12 10 20.2 20 38 18 17 21 39.3 30 21 12 18 43 57.4 从上表可以看出，如果同时加入标本与酶标抗体，没出现假阳性现象。2分钟后再加入酶标抗体，由于标本比酶标抗体先结合了两分钟，因此出现了7.4%的假阳性。30分钟后再加，假阳性高达57.4%。因此建议竞争抑制法的项目，加十个样本后立即加酶标抗体，这样对检测结果没有影响。
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