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孕妇母体IgG抗体效价检测操作规程

时间:2010-03-16 14:55来源:本站整理 点击:

【原理】
新生儿溶血病HDN发生的主要原因在于母子血型不合,血型系统最主要的类型为ABO血型系统,本实验采用微柱凝胶检测孕妇血清中的抗A(B)IgG抗体效价。
【试剂】
6%牛血清白蛋白;生理盐水;凝胶卡
【标本采集】
孕妇静脉血3毫升,肝素钠抗凝,孕妇爱人静脉血3毫升,肝素钠抗凝。将孕妇标本制作成血清标本,孕妇爱人标本制成0.5%红细胞标本(用生理盐水洗涤后配制)。

本文来源于中华检验医学网www.labweb.cn


【操作步骤】
1. 取孕妇血清标本50微升加入等体积的牛血清白蛋白,37度水浴温育30~60分钟;
2. 将血清倍比稀释成9管,依次为1:4、8、16、32、64、128、512、1024、2048管;
3. 将卡作好标记,在所有孔中加入经处理好的孕妇血清标本50ul;
4. 然后在所有孔中加入50ul的孕妇爱人0.5%红细胞标本;
5. 37度孵育15分钟(专用孵育箱);
6. 专用离心机离心5分钟;900rpm2分钟,1500rpm3分钟;
7. 取出判定结果;
【结果判定】
阳性结果:红细胞凝集块位于凝胶表面或凝胶中;
阴性结果:红细胞完全沉降到胶底部,在凝胶管底部形成红细胞扣。
【结果报告】
产生1+阳性凝集的最高稀释度,其倒数即为效价。
【注意事项】
1. 红细胞标本一定不能被细菌污染,否则出现假阳性反应,尽可能应用当日采集的新鲜血做本实验。如不得不用过夜血或陈旧血,则必须首先用该标本做阴性对照试验,以确定该标本是否可以做本试验。
2. 血清标本:血清标本必须充分去除纤维蛋白,否则标本中纤维蛋白在微柱凝胶中析出,阻碍红细胞沉淀,呈假阳性反应。
3. 如在微柱凝胶中出现溶血现象,强烈提示为红细胞抗原抗体阳性反应,也不排除其他原因所臻溶血,故对此标本一定认真分析,并向上级主管技术人员报告并讨论。
4. 本凝胶卡价格不菲,成本较高,请您节约使用。
【临床意义】
有人观察1632例孕妇血清中IgG抗A(B)≥1:64者249例;ABO-HDN发生率随IgG抗A(B)效价升高而上升;HDN与妊娠史的频率有关,随着年龄上升,孕妇个体IgG抗A(B)抗体效价也随之上升。夫妇间ABO血型不合者应及时检查产前血型抗体水平,用于预防不良妊娠的发生;IgG抗A(B)效价的高低与HDN的发病率成正比;孕妇血清IgG抗A(B)效价≥1:64需定期检测抗体效价水平及时用药降低抗体效价,以预防新生儿溶血病的发生。

本文来源于中华检验医学网www.labweb.cn
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