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1.2 方法
1.2.1 调查过程 标有内科呼吸病房住院患者以痰细菌培养为目的的痰标本均可纳入调查范围、随机调查。接到痰培养标本后记录时间（时、分）、按要求接种平板，同时涂片、紫外线照射1h，晾干后固定、革兰染色、显微镜检查。当日到病房询问患者留取标本时间并记录，同时记录是否漱口、深咳、晨痰。从患者留标本到实验室收到标本的时间为转运时间。同一份标本的显微镜检查和分离鉴定分别由两名以上工作人员完成。检验报告发出后，方可记录核查痰培养标本的细菌分离结果。
1.2.2 标本处理 按照全国临床检验操作规程 ［1］ ，挑取痰标本脓性或带血丝部分接种于血平板、麦康凯平板和嗜血杆菌专用培养基，经37℃需氧培养24～48h后观察结果，API试剂条鉴定分离菌。同时每份标本挑取脓性或带血丝部分涂于2.5×7.5cm的玻片、涂布面积不小于4cm 2 ，革兰染色后镜检整张涂片，记录所见细菌形态。镜检结果与其需氧菌分离结果进行比较，涂片中见到培养分离出的需氧菌相同形态，或涂片未发现需氧菌形态，培养也未分离出需氧菌，本研究定义为痰涂片与其需氧菌分离结果相符。痰涂片与其需氧菌分离结果相符的标本数与痰培养标本数之比为痰涂片与需氧菌分离结果的符合率。
1.3 统计学方法 计算满足与未满足晨痰、深咳、漱口三个条件的痰标本各自的需氧菌分离率，以及同时满足1个条件和满足2个条件的痰标本各自的需氧菌分离率。分别计算需氧菌分离为阳性和阴性的痰标本的平均送检时间，送检时间在1h内和超过1h、2h的痰标本各自的需氧菌分离率以及送检时间超过1h，涂片阳性而培养阴性的痰标本的百分率。低倍镜下估计中性白细胞和上皮细胞数，高倍 镜下观察细菌着色、形态及排列，按中性白细胞与上皮细胞数量的相关程度判定标本质量，见表1，且分别计算Q1、Q2、Q3、Q4的需氧菌分离率，以及痰涂片镜检与其需氧菌分离结果的符合率。显著性检测采用U检验。
表1 痰标本质量镜检的判断标准 ［略］
2 结果
2.1 不同条件的痰标本需氧菌分离率比较 106份采用自然咳痰法不同条件下留取的痰细菌培养标本需氧菌分离率及统计结果，见表2。随机抽样调查106份呼吸内科住院患者痰标本的采集质量，晨痰的需氧菌分离率55%，非晨痰标本需氧菌分离率17.6%，P<0.01，有非常显著统计学意义。深咳的痰标本需氧菌分离率54.9%，非深咳的痰标本需氧菌分离率20.8%，P<0.01，有非常显著统计学意义。深咳痰标本69%镜下可见柱状上皮细胞。漱口后留取的痰标本需氧菌分离率61.5%，未漱口留取的痰标本需氧菌分离率14.3%，P<0.01，差异有非常显著性。同时满足漱口、晨痰、深咳三个条件中任两个条件的痰标本需氧菌分离阳性率为63.3%，同时满足三个条件的合格的痰标本需氧菌阳性检出率为75.5%。
表2 不同条件的痰标本需氧菌分离率比较痰标本(略)
2.2 需氧菌分离标本送诊时间及结果 需氧菌分离阳性标本平均送检时间为51min，需氧菌分离阴性的标本平均送检时间为79min。送检时间在1h内的标本需氧菌分离率60%，与送检超过1h标本需氧菌分离率22.8%，需氧菌分离阳性率差异有显著性。送检时间超过1h、需氧菌分离阴 性的标本中，有19.1%涂片可见革兰阴性杆菌、革兰阳性球菌，尤以革兰阴性杆菌为多见。转运时间超过2h者需氧菌分离均为阴性。
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