体液检验 生化检验 免疫检验微生物类 血液检验 输血管理
返回首页

淋球菌感染的实验室诊断操作手册(2)

时间:2012-06-11 21:43来源:幸福检验 整理 点击:
 
  A3.1.1.2 VCN抑菌制
 
  1mL溶液中含万古霉素300μg、多粘菌素E750μg和制霉菌素1250单位。为抑制变形菌可加三甲氧苄氨嘧啶500μg.配成后应立即用完或贮于-20℃以下于2周内用完。
 
  A3.1.1.3 Iso-Vitalex增菌剂
 
  每升蒸馏水中加入维生素B120.01g、L-谷酰胺10.0g、P-氨基苯甲酸0.012g、腺嘌呤1.0g、鸟嘌呤0.03g、二磷酸吡啶核苷酸0.25g、硫胺焦磷酸0.1g、硝酸铁0.02g、硫胺0.003g、L-半胱氨酸25.9g、L-胱氨酸1.1g和葡萄糖100g。
 
  A3.1.1.4 2%血红蛋白溶液
 
  A3.1.2 配制法
 
  A3.1.2.1 制备双倍浓度的基础培养基:将GC基础培养基7.2g溶于100mL蒸馏水中(用500mL烧瓶),充分混匀,边加热边搅动直至煮沸,使充分溶解,经高压灭菌后凉到50℃待用。
 
  A3.1.2.2 将2g血红蛋白粉放入研钵,加2~3mL蒸馏水研成糊状,逐步加入蒸馏水直到100mL,高压121℃20min灭菌。
 
  A3.1.2.3 配制增菌剂:每安瓿增菌剂加入稀释液2mL,使溶解。
 
  A3.1.2.4 配制抑菌剂:每安瓿抑菌剂加入蒸馏水2mL,摇动,使充分溶解。
 
  A3.1.2.5 以无菌手续将100mLGC基础培养基、100mL2%血红蛋白液、2mL增菌剂和2mL抑菌剂混合后倒入平皿。4℃冰箱保存、待用。
 
  A3.2 改良Stuart运送培养基配制法
 
  琼脂4g、蒸馏水1000mL,加热到琼脂溶化并趁热加入氯化钠3g、氯化钾3g、无水磷酸二氢钠0.15g、硫代乙醇钠1g、新配制的1%氯化钙溶液10mL和1%氯化镁10mL,pH7.3。
 
  上述物质趁热搅动直到溶解。加入10g中性炭末。分装于13mm×10mm小管,每管5~6mL.在121℃灭菌20min,在琼脂未凝固前摇动小管,然后立即浸入冷水中使琼脂迅速凝固,要求使炭粒均匀分布在培养基中而不是沉于管底。
 
  A3.3 结果
 
  淋球菌经24~48h培养之后,可形成圆形、凸起、湿润、光滑、半透明或灰白色的菌落。边缘呈花瓣状。直径为0.5~1.0mm.用接种环触之有粘性。如继续培养,菌落体积增大,表面粗糙,边缘皱缩。淋球菌培养对症状很轻或无症状的女性和男性病人敏感性都高,因此,培养是目前世界卫生组织推荐的筛查和诊断淋病病人的主要实验室方法。
 
  A3.4 注意事项
 
  某些细菌如表皮葡萄球菌能抑制淋球菌的生长,因此,分离时应采用加抗生素的选择性培养基。但某些抗生素如万古霉素能抑制某些淋球菌(这种万古霉素敏感株在有些地区可达15%),因此,培养基中是否加入万古霉素及其加入量的多少应予注意。淋球菌对于干燥和寒冷的抵抗力很弱。为提高培养的成功率,标本离体时间越短越好。取材处离实验室较远时,应将标本先接种于运送培养基中。对症状不典型的男病人,最好是在晨起首次排尿前或排尿2~3h后采取标本。定期比较直接涂片和培养的阳性率有助于发现淋球菌培养分离中的问题。在涂片阳性而培养阴性的百分率大于平均数时,应对培养标本的采集方法、培养基的质量和培养条件等进行全面检查。
 
  A4 氧化酶试验
 
  淋球菌具有氧化酶,它产生的氧离子能将氧化酶试剂(盐酸四甲基对苯二胺或盐酸二甲基对苯二胺)氧化成醌类化合物,出现颜色反应。
------分隔线----------------------------
赞助商链接
推荐内容
赞助商链接
赞助商链接