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A1 标本的采集
女性采取标本的主要部位是宫颈管，次要部位是尿道、直肠和口咽部。男性应从尿道取材，对同性恋的男性，增加直肠和口咽部取材。
子宫颈内膜：采标本时应避免使用抗菌剂、麻醉剂和润滑剂。窥器可用温水湿润。将灭菌棉拭子、藻酸钙拭子或涤纶拭子插入宫颈管1～2cm，转动并停留拭子10～30s以吸取分泌物。
尿道：由男性病人前尿道取材时，将细棉拭子、藻酸钙拭子或接种环伸入尿道2～3cm，连续转动5s，取出分泌物应略带粘膜。在女病人应朝向耻骨联合按摩尿道后，如男病人一样的方法取材。
直肠：将棉拭子插入肛管3cm，转动数秒钟从紧靠肛环边的隐窝中取得分泌物。
口咽：用棉拭子在扁桃体隐窝和咽后壁取材。
A2 分泌物的涂片检查
为获得一薄而均匀的涂片，应将拭子在干净的玻片上滚动，然后在空气中干燥，加热固定，革兰染色、镜检。
A2.1 革兰染色
A2.1.1 将经过固定的涂膜铺满结晶紫溶液，染1min.迅速在流水中洗净。
A2.1.2 用碘液铺满涂片，染1min.用流水轻轻洗净。
A2.1.3 用丙酮－乙醇液脱色，直到涂膜无蓝色脱下为止。通常要10～20s，取决于涂膜的厚薄。避免脱色过分，否则革兰阳性菌误认为阴性菌。
A2.1.4 很快在流水中淋洗停止脱色，将过量的水用吸水纸吸干。
A2.1.5 用沙黄或复红液复染1min.
A2.1.6 用流水淋洗，用吸水纸轻轻吸干。
A2.2 结果
使用1000×油镜检查。在患者染色的标本中可见到大量红色多形核白细胞。有些细胞中吞有淋球菌。淋球菌为革兰阴性，呈肾形或卵圆形，常成对排列，两菌接触面平坦或稍凹。菌体长约0.7μm，宽约0.5μm。但两菌大小可有差异。不少细胞内常可见1到数对，甚至20～50对淋球菌。
A2.3 注意事项
涂片时不要用力涂擦，以防止细胞破裂和变形。涂片厚薄要合适。涂片过薄，涂片中几乎没有细胞，会造成假阴性；涂片过厚，脱色不易干净，会使各种成分难以分辨。女性生殖道中有些菌如不动杆菌等很象淋球菌，常可造成涂片的假阳性结果。咽和直肠标本的直接涂片结果也常由于正常菌丛或各种杂菌的掩盖而不可靠。
A3 淋球菌的分离培养
标本取后应立即接种于培养基中。国外常用的培养基有Thayer－Martin培养基及改良的Stuart运送培养基。国内也已研制成国产培养基，如加多粘菌素E（25μg/mL）的血液琼脂或巧克力琼脂。
初代分离时应用5％二氧化碳环境（烛缸），培养温度36℃为宜，相对湿度80％以上。培养24～48h观看结果。
A3.1 Thayer－Martin（TM）培养基配制法
A3.1.1 成分
A3.1.1.1 GC基础培养基
将蛋白胨1.5g、玉米粉0.1g、磷酸氢二钾（K2HPO4）0.4g、磷酸二氢钾（KH2PO4）0.1g、氯化钠（NaC1）0.5g和琼脂1.2g混合而成。
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