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3.1 IgG抗A抗体效价测定 见表1。
表1 50例“O”型孕妇IgG抗A抗体效价测定 略
根据表1结果进行配对资料的t检验，以积分值为比较数据，t=1.32，P>0.10，修正后两组积分值差异无显著 性。
3.2 IgG抗B抗体效价测定 见表2。
表2 50例“O”型孕妇IgG抗B抗体效价测定 略
根据表2结果进行配对资料的t检验，t=1.47，0.20>P>0.10，修正后两组积分值差异无显著性。
4 讨论
抗人球蛋白试验是检测血清中不完全血型抗体的经典方法，用已知抗原红细胞测定受检血清中相应的不完全抗体，或用已知抗体的抗血清测定受检红细胞上相应抗原。广泛应用于血型鉴定，抗体的检出和鉴定，交叉配血试验以及孕妇IgG抗体效价测定。抗人球法干扰少，结果准确，但因为反应需水浴1h，比较费时，因此寻找抗人球法的替代实验一直在研究中。抗入球法的关键是洗涤步骤，红细胞必须被生理盐水全程足量充分洗涤，盐水要用力冲入管底，使积压于管底的红细胞松离。切勿用手指堵住管口，颠倒混匀，以防来自皮肤的蛋白污染。
国内外加速不完全抗体反应的方法研究已有较长时间，其中由美国学者Lalerazi首先提出的Polybrene法可在3min内完成实验。该方法分致敏、促凝和再中和三步进行，BASO公司的Polybrene法操作与它极其类似。Polybrene法的实验原理是:凝聚胺（Polybrene）是带有正电荷的大分子物质，能够中和红细胞膜唾液酸组成的负电荷，减少细胞间静电斥力，使细胞间距缩短，而又不致引起红细胞间的非特异凝集。在生理盐水介质中长度较短的IgG抗体不能造成抗原抗体的凝集反应，但在Polybrene与低离子介质共同作用下细胞距离被缩短，IgG抗体可在细胞间搭成复桥，离心后可见凝集反应，非特异性的凝集可被带负电荷的重悬液（枸橼酸钠）消除，对IgM抗体的作用则是增强凝集反应强度 ［3］ 。其他的还有LIM（低离子强度）法，PEG（聚乙二醇）法和IRAT法等，但研究均停留在凝集反应的定性实验，缺少对抗体效价测定研究的半定量实验的资料。本实验50例孕妇血清不完全抗体效价半定量检测结果可见，凝聚胺法相对抗人球法敏感，平均高出2个滴度。通过减少凝聚胺法前两管凝集评分（2×12分），修正后凝聚胺法与抗人球法的效价积分值统计显示P>0.10或0.05，说明两种方法测定抗体效价结果差异无显著性，建议报告IgG抗A或 抗B抗体效价结果时，凝聚胺法降低2个滴度就是经典抗人球法的结果。凝聚胺试剂对冷抗体敏感，实验需在37℃水浴1min，强冷自身凝集素干扰时可置56℃水浴1min下松动细胞扣。室温低时若持续出现高滴度效价结果时应考虑这方面原因。纤维蛋白原会在凝聚胺试剂中凝集成纤维蛋白原块，干扰结果，建议用血清标本 ［4］ 。另外，鉴于凝聚胺中和红细胞表面负电荷是量的反应，正电荷与负电荷的相对量将影响实验结果，因此每批试剂要作质控，排除假阴性、假阳性结果。凝聚胺方法操作简便，无需1h水浴，准确性和稳定性达到实验要求，所以在IgG抗体效价测定实验中凝聚胺法可替代抗人球法。
参考文献
1 Braga GW，Bordin JO，Moreira Junior G，et al.Laboratory diagnosis of auto-immune hemolytic anemia:characteristics of the manual direct test of Polybrene.Rev Assoc Med Bras，1998Jan-Mar，44（1）:16-20.
2 吕鹏.最新输血技术学，北京:人民卫生出版社，1994，413-416.
3 Lalerazi P.The manual hexadimethrine bromide（polybrene）test:effects of serum proteins and practical applications.Transfusion1987，27（4）:295.
4 赵进生，旷婕萍.不完全抗体快速促凝剂的研制和初步应用报告.中国输血杂志，1992，（1）:
作者单位: 510095 广东省广州市血液中心 |