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尿液有形成分分析的方法学发展

时间:2010-04-04 18:24来源:收集整理 点击:

  1  尿液有形成分检测的意义

  在尿液形成过程中,泌尿道常有组织的脱落物和细胞渗出,尿离体离心或自行沉降,其沉降物称为尿沉渣,是尿液中的有形成分,包括细胞、管型、细菌、霉菌、结晶、药物等。尿沉渣检查是尿液分析的重要组成部分,以往直接将尿离心,取沉渣在显微镜下检查,称为“尿沉渣检查”[1],而目前开展的流式原理自动化检查方法,无需离心即可直接分析尿中有形成分,称为尿有形成分分析[2]。近年来强调分析尿中所有颗粒,即细胞、管型、细菌、霉菌、结晶、药物等。尿液有形成分分析可确定进入尿路中的细胞种类,如红细胞增多常提示尿路出血,进一步检查红细胞形态则有助于确定血尿来源;白细胞增多则提示尿路感染;不同尿路上皮细胞增多有助于判断各种尿路病变部位。管型增多则提示肾小球肾炎、肾小管(远端,集合管病变)及肾功能减退,所以说尿液有形成分分析可反映泌尿系统各部位的变化,协助对泌尿系统疾病进行诊断、定位、鉴别及预后判断等,为泌尿系统疾病诊断提供可靠依据。难怪有人称尿沉渣检查为“体外无创性肾活检”[3]。

  2  传统尿液有形成分的检验

  尿液有形成分分析有多种方法,而目前临床常用的包括显微镜检查法、干化学方法和流式细胞法。传统的离心后显微镜检查法,即取混匀的新鲜尿液10 ml于一刻度管内,用回转半径15 cm的水平离心机以1 500 r/ min(RCF=378 G)沉淀5 min,取出离心管倾去上层液体使剩约0.2 ml,混匀管底沉淀物,用吸管吸出沉淀物的20 μl,滴于载玻片上,用盖玻片覆盖后镜检。先用低倍镜(10×10倍)观察全片,再用高倍镜(10×40倍)仔细观察,细胞以高倍镜所见最低和最高数字表示,管型以低倍镜所见最低和最高数字表示[4]。这种传统方法受操作者主观影响误差较大,重复性差,判断不标准,不易定量,报告结果不利于临床动态观察,是缺乏标准化的实验方法。

  3  干化学对尿液有形成分的初筛

  20世纪80年代,90年代临床上大量使用干化学分析仪方法,尿干化学分析仪对尿中红细胞、白细胞检测是应用化学方法进行的。对尿中白细胞的测定是基于中性粒细胞胞浆内含有酯酶,可催化吲哚酚酯分解出吲哚酚,后者再与重氮盐反应呈现紫色复合物,其颜色深浅与细胞多少呈比例关系,但淋巴细胞不含酯酶,则不与淋巴细胞发生反应。此外高比重尿,尿中含有头孢霉素、庆大霉素、四环素、硼酸、草酸也可致假阴性。尿中含有里甲醛、呋喃坦啶及大量胆红素,氧化型清洁剂则可致假阴性。尿干化学分析仪对红细胞测定是利用血红蛋白(Hb)具有过氧化氢酶样活性,可使过氧化氢茴香素或过氧化氢稀枯分解出[O],后者能氧化色原使其显色,它既可测完整HBC,也可测游离Hb,此法最大问题是受易热酶干扰。在尿液中常存在类过氧化酶性的物质,其具有Hb相同的氧化色原的作用,造成红细胞结果偏高或出现假阳性。对尿中细菌的检测主要基于尿液中细菌能产生的亚硝酸盐含量,只有尿中致病菌含有硝酸盐还原酶时,且尿中含有适量硝酸盐,允许细菌与尿液充分作用(在膀胱停留间隔>4 h),否则试验将出现假阴性[5]。干化学分析仪灵敏度较高,相对特异性较差,假阳性较多,只能作为患者诊断的初筛,不能作为确诊的依据。干化学分析对尿中红白细胞的检查不能代替显微镜,大量的临床试验证明,只有在干化学结果尿蛋白,尿亚硝酸盐,尿白细胞(WBC),尿RBC结果均为阴性且尿液来自非泌尿系疾病患者,才可视为尿液中的RBC,WBC数量在参考范围内可免于镜检[6]。尿有形成分分析是尿常规检验的核心,具有非常重要的临床价值,而要获得有价值的实验资料,就必须实行标准化、规范化的尿沉渣检查。

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