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             再次混匀，分别读取吸光度为终末吸光度。
  ４． 计算：Ｒ、Ｓ、Ｂ管分别减自已的试剂空白，其结果用下公式计算
      Ｆe=(R-B/S-B)标准液浓度。   总铁结合力测定：
   血清测定前要作如下处理：血清0.5ml加铁溶液１ml混匀1分钟，置室温５－３０分钟再加入２／３量匙的碳酸镁，混匀１分钟，放室温３０－６０分钟，其间振摇５次，然后3000转／分离心５分钟，取上清液0.5ml按血清铁法进行铁测定。
   计算：总铁结合力＝（Ｒ－Ｂ／Ｓ－Ｂ）×标准液浓度×３
         未饱和铁结合力＝总铁结合力－血清铁
         铁饱和度＝（血清铁／总铁结合力）×１００％ 
    ５．正常参考值：
      ＳＩ  脐血：12.9~42.4umol/L，出生时：26.9~35.8umol/L；6个月~２岁：2.9~21.5umol/L,２~6岁：3.6~22.1umol/L,６~12岁：4.1~22.0／Ｌ;
      SI 男：14.3~26.9umol／L。女：10.7~25.1umol/L。
      TIBC男：40.28~64.44umol/L。女47.44~72.49umol/L。
      UIBC男：29.54~53.8umol/L。女：38.49~63.54umol/L
      ISAT男：0.28~0.5。女：0.25~0.45。
     ６．注意事项：标本新鲜无溶血，所有的用器不能含有铁，每次需作试剂空白。
７．临床意义：血清铁及总铁结合力的高低受铁的吸收、贮存及利用因素的影响，在不同疾病有相应的变化。血清铁水平代表铁进入和离开循环之间的平衡，总铁结合力于铁贮存减少时开始增高。
 ７．１血清铁增加：见于ＨＡ、ＡＡ、ＭＡ、ＳＡ等。
 ７．２血清铁降低：见于ＩＤＡ、肾病综合症、慢性贫血、Vit 缺乏、先天性转铁蛋白缺乏。
７．３总铁结合力降低：见于ＡＡ、ＭＡ、ＨＡ、慢性贫血、肾病综合症、Vit 缺乏、先天性转铁蛋白缺乏。
 ７．４总铁结合力增加：见于ＩＤＡ、ＨＡ、真性ＲＢＣ曾多症、肝炎、铁摄入过量及急`、慢性失血。