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2 试剂 2.1 试剂的选择 试剂的质量是确保结果可靠性的先决条件，试剂的选择一方面要根据所用检测仪器的类型，另一方面要根据试验检测目的选择对其敏感的试剂。如APTT试验时所用的活化剂不同，对血内肝素狼疮抗凝物质及因子Ⅷ、Ⅸ缺乏症的敏感性也不同，所以要根据检测项目来选择不同活化剂的APTT试剂，为了试验结果便于比较和估计抗凝剂疗效或指导用药，最好选择INR报告方式，因此，选择试剂应标有ISI值，理论上ISI值越接近1.0越好，ISI值的高低决定INR的精度，也决定了试剂的质量［６］。 2.2 试剂的使用及保存 2.2.1 试剂在使用时应严格按说明书操作。试剂复溶剂一般为蒸馏水，注射用水及pH 6.0～7.0去离子水，如复溶剂pH值增高会使凝固时间延长，若水质混浊表明有污染或钙离子存在，含有保护剂抗生素抗体或其他添加剂的水，不能用于试剂的复溶剂。复溶剂后的试剂不能反复冻融，不用时应加盖并保存在2℃～8℃；所有试剂均应在有效期内使用。 2.2.2 试剂使用中要注意污染的问题，避免如试剂瓶盖错盖，造成交叉污染，用同一吸管或移液头造成试剂标本的交叉污染等。 3 操作的因素 试验操作技术对检验结果有很大的影响，即使很微小的变化也会造成试验结果的明显的变化。 3.1 首先要检查仪器电源、光源是否稳定，预热时间或温度设置是否正确。 3.2 检查所有试剂、缓冲液、标本是否合格，如有问题及时更换。 3.3 每次检测之前，应先检测参比血浆或质控血浆以确保检测结果的准确性。 3.4 加试剂时要防止气泡产生，无论是透射光还是散射光测定，防止气泡产生是保证结果准确性的前提，有气泡时凝血时间会假性延长。 3.5 在加样过程中除保证样品量的准确外，还应保持加样器与反应杯垂直，加样动作要稳、准、快，既要让感应器充分接触，又不能停顿时间过长。测定过程中应保持反应杯的清洁，防止外异物掉入比色杯。 4 药物与疾病因素 某些药物本身就具有影响凝血机制的功能或是有协同抗凝作用，如水合氯醛、阿司匹林、保泰松、氯贝丁酯、吲哚美辛等可使口服抗凝药物在血液中浓度明显增高。有资料表明［７］，大剂量使用青霉素，当血浆青霉素浓度达5000u/ml时PT、APTT明显延长，且随药物浓度的增加而时间延长；头孢哌酮具有甲硫甲唑环的侧链与前凝血酶原相仿；羧酶可错误地与抗生素结合而导致凝血酶原的形成减少，干扰肝脏中VK的代谢，导致低凝血酶血症［８］。肝素、华法林、双香豆素、低分子右旋糖酐等可抑制凝血酶，从而妨碍纤维蛋白原变为纤维蛋白，阻止血小板的粘附和聚集，使血浆中抗凝物质含量增多，影响凝血试验，使凝固时间延长。 除药物对凝血试验结果的影响之外，很多疾病的因素也对结果有很大的影响。如DIC时，由于凝血因子的大量消耗和产生的FDP拮抗凝血酶的作用，使PT延长。但在DIC早期，病人血液处于高凝状态，PT缩短。此时分析血凝结果一定要结合患者病情进展程度。各种疾病导致溶血、黄疸脂血、红细胞含有磷脂，能缩短APTT的值。当HCT＞50%时血浆中抗凝剂浓度增高，APTT假性延长；相反，HTC＜20%时APTT假性缩短，应适当调整凝剂用量可减少影响。各种原因引起的出血倾向，不能仅依靠血凝分析判断作为诊断指标，因为血凝分析受的影响因素太多太杂，应结合血小板计数、3P试验等共同作为诊断指标。 |