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溶血对干化学和湿化学法测定血清胆红素的影响

时间:2010-04-19 22:21来源:收集整理 点击:

  长期以来,人们将人体血清胆红素描述为“总胆红素”,“直接胆红素(亦称结合胆红素)”和“间接胆红素(亦称未结合胆红素)”[1]。而干化学法则将胆红素分为“总胆红素”、“结合胆红素”、“未结合胆红素”和“δ胆红素”,并认为,总胆红素=结合胆红素-未结合胆红素+δ胆红素,直接胆红素=总胆红素未结合胆红素=结合胆红素+δ胆红素[2]。为了解溶血对胆红素测定的影响,我们测定不同血红蛋白浓度标本的总胆红素、结合胆红素,并进行方法学比较,现报告如下。

  1  材料与方法

  1.1  实验材料

  1.1.1  仪器

  1.1.1.1  湿化学方法  日本OLYMPUS AU-1000全自动生化分析仪
  1.1.1.2  干化学方法  美国VITROS 250全自动生化分析仪。

  1.1.2  试剂

  1.1.2.1  湿化学方法  日本OLYMPUS配套试剂。
  1.1.2.2  干化学方法  美国VITROS配套试剂。

  1.2  实验方法  用两种方法分别测定30份不同浓度正常血清的总胆红素和结合胆红素各2次,取平均值,见图1、图2。

  取1份无溶血混合血清。各分成4份,其中3份加入不同浓度的血红蛋白液(Hb),造成人工溶血现象,并将对照组加入同体积生理盐水,用两种方法测定各管中的总胆红素和结合胆红素(重复测定3次取平均值)。采用t检验比较溶血对两种方法的影响。

  2  结果

  干化学与湿化学测定胆红素正常组结果比较见表1、表2。干、湿化学测定总胆红素结果差异无显著性(P>0.05),γ=0.992。直线回归方程Y=1.01X+0.06。而两种方法测定结合胆红素差异有显著性(P<0.01)。

  溶血时,干化学法测定结合胆红素与无溶血时差异无显著性(P>0.05),总胆红素测定与无溶血时差异有显著性(P<0.01);溶血时,湿化学法测定结合胆红素、总胆红素与无溶血时差异均有显著性(P均<0.01)。

  表1  不同浓度Hb对干、湿化学法测定TBIL的影响方法(略)

  注:与Hb浓度为0比较,*P<0.01;ΔP<0.01

  表2  不同浓度Hb对干、湿化学法测定Bc的影响方法(略)

  注:与Hb浓度为0比较,*P>0.05;ΔP<0.01

  图1  干、湿化学法TBIL测定相关图(略)

  图2  干、湿化学结合胆红素测定相关图(略)

  3  讨论

  由本实验可知,干、湿化学两种方法测定TBIL差异无显著性,与黄恩芳[3]得出的结论相同,两者结果差异无显著性(P>0.05)。

  在干化学法中认为TBIL=Bc+Bu+δB。Bc与DB不同,DB包含约67%~75%的双葡萄糖醛酸胆红素和约85%的δB[4]。然而,湿化学中认为DB=Bc。由本实验可知,湿化学中的DB与干化学中的Bc是不同的两个概念,其测定结果也差异有显著性,二者不可混为一谈。

  溶血对两种方法TBIL测定均有影响,正干扰明显。而干化学测Bc则不受溶血(Hb<12 g/L)影响(P>0.05),湿化学正干扰明显(P<0.01)。建议临床溶血标本测定Bc时采用干化学法。

  参考文献:

  [1]  Lott J A.New concepts in serum bilirubin measurement[J].Laboratory Management,1987,4:4148.
  [2]  VITROS干片方法学手册.
  [3]  黄恩芳,张文,高玲,等.陕西医学检验[J],2001,2(16):1214.
  [4]  Cox C J,Valdiserri RO,Zerhe T,et al.Ektachem bilirubin fractions in an adult outpatient population[J].Laboratory Medicine,1987,18(3):159161.

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