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菌尿对尿液分析仪测定尿红细胞的影响探讨

时间:2010-04-13 22:47来源:收集整理 点击:

  尿红细胞检测是诊断泌尿系疾病,特别是肾病的重要实验指标之一。显微镜检查仍是目前检测尿液有形成份的主要手段。随着自动化尿液分析仪的问世,给尿液分析过筛检测带来了一些方便,但该型仪器是否受菌尿的影响,造成尿红细胞实验结果差异,迄今未引起注意,本文对此进行了研究,现报告如下。

 1 材料与方法

    1.1 标本来源 (1)菌尿:用一次性洁净塑料尿杯随机收集门诊怀疑有泌尿系感染患者晨尿200例。(2)非菌尿:用一次性洁净塑料尿杯随机收集院内确诊非泌尿系感染患者晨尿200例。(3)人工菌尿:用一次性洁净塑料尿杯随机收集我科正常性尿液50例,然后将这些尿液标本随机加入培养细菌(属泌尿系感染的细菌,专用培养基培养 [2]  )使用细菌数为105~107/ml之间,同时用不加细菌的尿液作为对照组。

    1.2 实验器材 尿沉渣分析仪DiaSys R/S500(美国);FA100型尿液分析仪(山西亚森)及配套试带(烟台宝威批号:2004021201);单克隆潜血试纸(万华普曼公司)。

  1.3 实验方法

     1.3.1 尿红细胞的测定 用尿沉渣分析仪、尿液分析仪(干化学法)和直接镜检法对红细胞进行测定。其方法为:尿液混匀后,用一次性专用试管分别取非菌尿组和菌尿组尿液10ml,直接在DiaSys R/S500和FA100上,严格按说明书操作,记录实验结果(每天实验前用质控对仪器进行监控);在高倍镜下计数10个大方格的红细胞数,以每微升红细胞平均数报告,所有试验均在2h内完成。

     1.3.2 尿潜血的测定 尿液混匀后,直接将潜血试纸放入尿液中,30s后取出,在5min内观察结果。结果判断:在测试线及反应线上同时出现两条紫红色色带者为阳性(潜血试纸对血红蛋白的敏感性是0.2ng/ml),只在测试带出现一条紫红色色带者为阴性。

  2 结果

     2.1 DiaSys R/S500和镜检法测定菌尿组和非菌尿组尿液 尿红细胞结果分别为(204±123.0)×10 6 /L和(108±98.1)×10 6 /L。如果以镜检法检查尿红细胞为标准,则菌尿组UF-100测定红细胞数假阳性率为21.5%;而非菌尿组为6.5%。两者经t检验,P<0.01,差异有非常显著性。

     2.2 FA100型尿液分析仪和单克隆潜血试纸法测定菌尿组和非菌尿组尿液 尿红细胞(或潜血)结果如果以单克隆潜血试纸法检查尿潜血为标准,则菌尿组尿液分析仪测定尿潜血假阳性率为19.5%;而非菌尿组的假阳性率为4.5%。两者经t检验,P<0.01,差异有非常显著性。

     2.3 50例人工菌尿加入前后两种方法的测定结果 DiaSys R/S500测定红细胞结果分别为(10±10.0)×10 6 /L和(45±28.0)×10 6 /L。经统计学处理,P<0.01,差异有非常显著性。FA100型尿液分析仪在加入前后,尿潜血见表1。经非参数统计学处理,P<0.01,差异有非常显著性。

  表1 50例人工菌尿FA100红细胞测定结果略


     3 讨论

  显微镜血尿是一系列泌尿系病理变化的初始信号,因此没有症状的血尿检测对疾病的早期诊断显得十分重要。同样,血尿检测的准确程度也同样重要,因为基于阳性发现患者要经历对身体有侵害和昂贵的泌尿学检查。目前,显微镜和干化学检查法是诊断显微镜血尿的两种常用方法。干化学法具有快速、操作简单,使得更具有吸引力。但是,干化学法在测定血尿中还存在一定的局限性,如尿中维生素C的存在会导致干化学法红细胞检查的阴性;在泌尿系感染中,多数革兰阴性菌和某些革兰阳性菌可能释放过氧化物酶,这些物质和酶在干化学法测定尿红细胞时,都能使试带中的过氧化氢茴香素或过氧化氢稀枯分解出氧原子, 后者使色源呈色而出现假阳性。本文结果显示:菌尿组FA100型尿液分析仪测定红细胞为阳性,而潜血板法为阴性,占总检测数的百分比为19.5%;而非菌尿组的百分比为4.5%;同时又用培养细菌作成菌尿,再用尿液分析仪进行试验测定其红细胞,也得出同样的结果。因此可以肯定菌尿对尿红细胞测定有一定的影响。为了证实这一影响因素,我们进行了下列两项实验:(1)用常见的泌尿系感染的细菌,配制成不同浓度的细菌,放置15min后,用FA100型尿液分析仪测定其红细胞,结果显示由于细菌种类不同,对尿红细胞测定结果影响程度也不相同(见表2),以假单胞菌属最大,细菌浓度为10 4 /ml即影响红细胞测定。(2)过氧化物酶配制成不同浓度,在用干化学尿液分析仪进行实验,结果显示:过氧化酶浓度为2U/ml时干化学法即呈阳性结果(见表3)。因此,我们认为菌尿是引起干化学法测定尿红细胞假阳性的原因之一。

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