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三、试剂间化学污染的判别 由于试剂中化学成分非常复杂，各种稳定剂、反应物质、缓冲体系共存，且各品种、各厂商的试剂内含物均不同，因此时机间的化学污染往往较难判别。日常工作中往往是仪器评估没问题，而用户使用时存有污染；质控品和Westgard法则不起作用，质控往往在控；污染具有偶然性，并不是每次都出现。这就导致了判别此类污染的困难性。 当按照日常的分析顺序出现异常结果时，将出现异常结果的分析项目及其前一个项目单独复检又恢复正常，多是由于发生试剂间交叉污染所致。但由于试剂成分的复杂多样性，仪器状况的独特性，可能发生的试剂间交叉污染的情况不尽相同。各个公司所提供的产品说明书长不能够全面的反映试剂组成的情况，因此需要通过试验才能发现试剂交叉污染可能带来的干扰。一般可以用以下试验来加以判别： １.将某一试剂作为样本进行全套项目测定，观察各项生化结果的情况，进而确定发生试剂交叉污染时造成直接干扰的项目。 ２.一份样本分成两份，一份加生理盐水或其他适当的稀释液，另一份加等量的某试剂，同时测定，观察结果的变化，进而确定发生试剂交叉污染时造成直接干扰的项目。 ３.试剂交叉污染试验方法：（1）交叉污染初试：假设有3个项目 A，B，C，以一混合血清作为标本，按以下顺序测试：A，A，A，A，A，B，A，C，A，B，B，B，B，B，C，B，C，C，C，C，C。得到的结果分别为：A1，A2，A3，A4，A5，BA-B，AB-A，CA-C，AC-A，B1，B2，B3，B4，B5，CB-C，BC-B，C1，C2，C3，C4，C5（AB-A：表示B项目对A项目污染时A项目的测定值，其余表示类同）。以A2~A5、B2~B5、C2~C5的4次测定平均值分别作为A、B、C项目无污染时的测定值。若（AB-A/A×100%）<95%或>105%则强烈支持B试剂对A有交叉污染。(2)疑似污染确认：若上述初试验结果B对A有污染，则可进行以下试验进行确认，测定顺序为：B,A,A,A,结果为：B，A1，A2，A3。若（A1/A3×100%）<95%或>105%，则强烈支持B对A有交叉污染。A1→A3的结果可观察受B污染的程度是否逐渐减轻。 四、消除试剂间化学污染的方法 １.要求检验人员对仪器工作流程、试剂组成、测定原理要了如指掌，对试剂交叉污染的各种可能性加以考虑，合理设计程序。更换试剂时应仔细研究说明书，发现和避免可能存在的试剂交叉污染。 ２.当发现有交叉污染时，应对仪器进行保养，如更换比色杯、管道，用无水乙醇擦洗试剂针和搅拌棒，检查清洗装置及效果等。 ３.合理安排检测项目的顺序，在有交叉污染的检测项目中间插入一个或两个非污染项目。最彻底的做法则是将被干扰项目置于干扰项目之前，以消除干扰发生的可能。由于各个感厂商试剂盒原理不同，内含成分不同，故无固定的测定顺序格式，需要自己摸索。一般检测顺序有以下原则：（1）不受上一试剂的干扰；（2）不影响下一试剂测定；（3）不影响测试速度；（4）充分运用剩余试剂位开展新项目；（5）利用好仪器的功能。 ４.当合理设置测试顺序无法消除交叉污染时，可使用生化仪的试剂针、比色杯清晰程序，对试剂针、比色杯进行2次或多次清洗。用碱性清洗掖及酸性清洗掖冲洗试剂针可以有效地避免携带污染。 ５.选用具有抗交叉污染的试剂盒：如在游离胆固醇试剂中添加胆固醇酯酶抑制剂，以减少胆固醇酯酶水解胆固醇酯而引起对游离胆固醇测定的污染。 |