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摘要 近年来梅毒的发病率有逐年增加的趋势、研究新的快速、价廉、简便、敏感且特异的诊断方法是当前主要研究热点，而设计新试剂盒的关键在于，对现有试剂盒优、缺点的认识和改良，利用人工合成梅毒螺旋体原设计出新的检测方法。对梅毒螺旋体抗原的分析及人工合成，国外早在1989年就已开始进行，几年来发展迅速，目前已有各种针对不同需要的试剂盒。 关键词 梅毒 血清学诊断 合成抗原 目前虽然各国之间梅毒流行的情况送别很大，但它依旧是十分重要的社会和医学问题[1]。近年来，大多数欧洲国家梅毒发病率显著下降，已小于2/10万。但在前苏联国家中，梅毒的发病率却显著上升，如俄罗斯梅毒的发病率大于32/10万[2]。即使在美国，在特定的种族人群中梅毒的发病率依然很高[3]。在我国，梅毒的发病率逐年增多，所以研究新的快速、价廉、简便、敏感且特异的诊断方法，对该病的防治有着重要的意义。现对目前已有诊断方法的优缺点，以及最新诊断方法作一综述。 梅毒常用诊断方法 （一）检查梅毒螺旋体：可用病损处的渗出液进行暗视野、涂片银染色、免疫荧光染色、家兔感染试验（RIT）或PCR法检测，以及用酶免疫法（EIA）理论设计的，利用单克隆抗体检验梅毒螺旋体的方法，如Visuwell试验[4]。①暗视野显微镜检查由于对取材、检查技术要求较高；并且在口腔及肛门部位有口腔螺旋体、大齿密螺旋体、小齿密螺旋体及生殖器螺旋体等其他条件致病螺旋体存在，暗视野检查时不易与它们区分；此外梅毒螺旋体本身很脆弱，容易受外界条件如服用过抗生素、病损处外用一些化学药物等的影响，该方法敏感性较低，所以暗视野检查阳性也不能排除梅毒的可能性。但由于它特异性很高，经过训练的检验人员在暗视野显微镜下看到形态典型的梅毒螺旋体，结合临床症状即可作出早期诊断。②镀银染色法检查螺旋体，适用于缺乏暗神显微镜的基层单位。③免疫荧光染色是用抗梅毒螺旋体抗血清或单克隆抗体，加非致病性螺旋体培养物进行吸收，再与异硫氰酸荧光素（FITC）相结合，用此方法来染梅毒螺旋体，在荧光显微镜下读结果，阳性者可见绿色荧光螺旋体，其优点是可区分梅毒螺旋体与其他条件致病性螺旋体，对口腔、肛门等部位的损害有鉴别价值，且敏感性亦有所提高。④RIT是利用家兔对梅毒螺旋体的易感性，把梅毒螺旋体注射于成年新西兰白兔睾丸内，观察有无感染亦象。RIT是经典的梅毒诊断方法，由于其费用高、检查时间长等弊病目前仅用于科学研究。⑤PCR法是较新的方法，它能对生殖器溃疡早期鉴别诊断，区分梅毒、生殖器疱疹及软下疳[5]。它可分为PCR和RTPCR，PCR的设计主要针对编码梅毒螺旋本特异性抗原和TpN47（Tpp47）的DNA开放编码区，常见的引物设计见附表。 由于在PCR中会偶然出现非特异的PCR产物而干扰结果，这就必须用特异性的DNA探针进行DNA-DNA杂交来提高PCR的特异性及敏感性。此外用TpN47设计的PCR，由于TpN47的保守性，雅司螺旋体可产生类似的PCR产物，所以这种设计的PCR不能区分梅毒和雅司；但可以区分梅毒螺旋体和引博氏疏螺旋体，这就可以解决梅毒与莱姆病之间血清诊断中的免疫交叉问题[6]。另一种是RT-PCR，常见的设计是针对梅毒螺旋体的16s rRNA 366bp片段 |