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涂片找抗酸杆菌操作规程(改良碱性复红法)

时间:2010-10-17 18:28来源:幸福检验 xf366.com 点击:
1 检验目的
    检验样本中是否含有抗酸杆菌,为临床提供诊断依据。
 
2 原理
结核菌、麻疯杆菌、耻垢菌等抗酸性菌,因其菌体表面有一层脂或脂质之皮膜不易着色,但一经着色后酸或乙醇的作用亦是不容易把它脱色。利用这特性并以增强的染色液予染色,然后再以酸及乙醇加以处理,使其脱色后再对比染色,此时抗酸性菌仍是固定着最初色素的颜色(红色)。
 
3标本要求
    1)标本类型:病人的痰、穿刺关节液、腹水、胸积液、组织、脑脊液、分泌物、尿液等
2)标本采集:见标本采集手册(一般须得深咳痰,其它无特殊要求。)
3)标本储存和运输:可室温保存、室温运送。病人标本须密封运送以避免污染环境。
 
4 容器和添加剂类型
痰盒、尿杯、试管等
 
6 试剂
(1)       试剂名称:结核菌染色液
2)试剂生产厂家:广东省结核病研究所统一配制
3)包装规格:3X500ML
4)试剂盒组成:
试剂1:石碳酸复红液
试剂2:酸性酒精溶液
试剂3:亚甲基蓝溶液
 
7仪器设备:
 
 
8操作步骤
⑴涂片经火焰固定,加石碳酸复红液染色5分钟或更久(需加温)。
⑵水洗(之后尽可能将水沥干)。
⑶加酸性酒精溶液,脱色1-2分钟。
⑷水洗(假如标本面还可以看到残存红色时,再加酸性酒精溶液脱掉红色为止)。
⑸加亚甲基蓝溶液染色30秒,水洗,干燥。
(6)镜检。
 
9 干扰和交叉反应
麻风菌可能对检验结果产生影响。
 
10   生物参考区间
涂片未见抗酸杆菌
 
11 患者检验结果的可报告区间
涂片未见抗酸杆菌/涂片见细长、红色抗酸杆菌
 
12 临床意义

结核分枝杆菌不产生内毒素和外毒素,其毒力主要是在机体中细胞内、外生长与大量繁殖的能力,细菌成分与其代谢产物引起免疫反应(Ⅳ型)导致一系列组织学上的意义。

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