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LUCY-2型化学发光仪即半自动化学发光免疫分析仪，是将化学发光或生物发光体系与免疫反应相结合，用于检测微量抗原或抗体的一种新型标记免疫测定技术。其检测原理与放射免疫和酶免疫相似，不同之处是以发光物质代替放射性核索或酶作为标记物，并籍助自身的发光强度直接进行测定，光量子产额与标记物的量成正比，由此可以建立标准曲线并计算样品中待测物质的含量。相比之下化学发光免疫分析的灵敏度与可测范围远远高于酶免产品，同时具有放射免疫的高灵敏度，应用于甲状腺系统、肿瘤标记物、生殖系统等重要指标的测定，有高度的优越性，虽然它兼具ELISA法简便、快速的操作方法，但其每个环节都会对发光值产生影响，出现错误的结果。所以有必要对临床操作中可能出现的问题及其解决办法加以探讨。
2环境的要求 为了保证实验的准确性，严格控制实验室温度在18—25℃，温度过高或过低影响发光值，影响实验结果。 3操作中存在的问题及处理方法 3.1加样 3.1.1可能出现的问题： ①血清分离不好或者待测标本污染或溶血。如果血清分离不好，标本中含有纤维蛋白丝就会附着于微孑L底部，干扰抗原抗体的反应，影响结果。标本溶血或者污染会使红细胞中过氧化酶释放出来，影响反应。细菌蛋白也会干扰实验结果。 ②手工操作中，应避免试剂与标本的污染，特别是在加样过程中要戴上一次性手套，操作后彻底洗手，加样头不可混用，以免引起交叉感染。
①用于测定化学发光的标本基本以血清和体液为主，但大部分是以血清为主，用正确的采血技术收集全血标本，37℃静置th，离心分离提取血清用于检测，采血后24 h内测定。若需要长时间保存，则应冻存于- 20℃以下，避免反复冻融。使用前恢复到室温，轻轻晃动摇匀，若标本有沉淀物形成，应离心出去方可使用。如标本需要稀释时，用洁净无菌的生理盐水稀释。 ②加标本或工作液时应加在化学发光微孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可溅出，不可产生气泡。吸取标本与标准品的量应准确，吸头尖插入液面下的深度应一致。加酶结合物时吸头应悬空，避免因吸头碰到小孔边缘或者孔中试剂而造成酶结合物污染。 ③从冰箱里取出试剂应于室温平衡后使用。 3.2 温育 LUCY-2型化学发光有两种方法：一步法和二步法。一般采用一步法，不论哪种方法，温育的时间应按规定力求准确。温育时间过短使结果偏低，过长将导致非特异性结合物吸附于微孔内，温箱的温度必须严格控制，过高过低都会影响发光值，造成错误的结果。最好使用固定的温箱，因为温育的温度有两种，一种是37℃，一种是24士2℃，如果反复调节温箱温度，将会影响实验结果。温育的过程中将微孔用封膜覆盖，避免边缘效应。 3.3 洗板用手工洗板时洗板要彻底，洗液应注满每孔，但不可用水过猛，避免孔与孔之间交叉，不能产生气泡，每次洗涤均应甩干孔内液体；用洗板机洗板时洗液不足可能导致洗板不彻底；洗板针堵塞，可能导致抽吸不完全，洗板不畅使效果变差。以上情况均可造成结果偏差。解决方法是洗板机每天使用时进行注液量和残液量的校正，使用完毕后用蒸馏水冲洗，保持管道畅通；洗涤时确认注满每个反应孔；洗涤后每个孔的残液量不得大于2 ul，最后将孔内液体拍干。 |