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SYSMEX XE-2100D血液分析仪白细胞分类检测原理及散

时间:2010-03-23 15:45来源:未知 点击:

孙 奕
(嘉兴市第一医院浙江省嘉兴市314000)
    我院自2005年购入SYSMEX XE一2100D血液分析仪以来.在使用与维护过程中发现.由于仪器检测原理的特殊性,不仅平时要注意按照操作规程做好仪器的使用维护.而且需要注意积累对仪器五分类散点图及含义性报警的辨别经验。了解仪器的工作原理,能解释各类细胞群所出现的位置,以避免因为仪器不良工作状态引起检测报告的误报和错报。现就XE一2IOOD的白细胞分类检测原理和常见故障的处理介绍如下,供同行参考。

    1 XE一21OOD的白细胞分类检测原理XE一2100D采用半导体激光的流式细胞技术结合聚次甲基染料进行染色技术来对白细胞进行分类的。即用一束半导体激光照射经过处理的细胞,根据每个细胞产生的前向散射光、侧向散射光和侧向荧光信号来相互区分。前向散射光反映细胞体积:侧向散射光反映细胞内涵物,如核和颗粒;侧向荧光反映细胞脱氧核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)含量。

    XE一2100D可将白细胞大致分成淋巴细胞(Lymp)、单核细胞(Mono)、中性粒细胞(Neut)、嗜酸性粒细胞(Eo)和嗜碱性粒细胞(Baso)等5大类。它是通过WBC/BASO通道检测WBC (白细胞数)和Baso;通过4DIFF通道进行4分类,即分辨出Lymp、Mono、Neut+Baso和Eo;通过计算得Neut,即Neut=(Neut+Baso)一Baso.

    WBC/BASO检测通道:在此通道中, 特殊嗜碱性粒细胞溶血素试剂(STROMATOLYSER—FB)将血液中的红细胞和血小板溶解,形成影红细胞:将除嗜碱性粒细胞外的白细胞破坏.形成裸核白细胞。通过流式细胞检测,利用前向和侧向散射光信号,使嗜碱性粒细胞与其它细胞因体积差异而区分。

    以前向散射光强度为纵坐标,侧向散射光为横坐标,在WBC/BASO散点图中则显示出影红细胞(Ghost)、嗜碱性粒细胞和其它白细胞等3个分群。其它白细胞即是除嗜碱性粒细胞的裸核白细胞(也将其称为WBC分群)。 白细胞数为嗜碱性粒细胞数与其它白细胞数之和。有核红细胞也包括在内。
   
   (2)4DIFF检测通道:在4DIFF通道中。溶血素试剂(STROMATOLYSER一4DL)使得血液中的红细胞和血小板被溶解,成为影细胞;并将白细胞膜轻微破坏.即在白细胞膜上打出小孔。造成其通透性增加。FFS试剂(STROMA.TOLYSER一4DS.XE2100D也称为FFS试剂)中的聚次甲基荧光染料就能进入破损的白细胞内,与细胞内的核酸和细胞浆内的细胞器结合。染色后的细胞经波长633nm的激光照射。使侧向荧光强度与细胞内核酸含量成正比。FFS试剂中还含有一种有机酸.可与白细胞中嗜酸性颗粒特异结合,依据侧向散射光信号,得以区分嗜酸性粒细胞和中性粒细胞。从而通过流式细胞检测,用侧向荧光和侧向散射光信号就能区分出4类白细胞。
   
    以侧向荧光强度为纵坐标.侧向散射光为横坐标.4DIFF散点图中显示出影红细胞、淋巴细胞、单核细胞、中性+嗜碱性粒细胞和嗜酸性粒细胞等几个分群。
   
    2 白细胞分类系统的常见故障及处理
   
    2.1 故障一
   
    (1)故障现象:检测的白细胞数(WBC)极低,且不分类。此时,4DIFF散点图各分群分布位置很低,接近横坐标,各分群的颜色几乎没有区别。WBC/BASO散点图分群分布正常。
在仪器控制电脑的Service界面中,DIFF项目下,Dif-y<30 (依次点击:Brower-Service-DifF)。
   
    (2)原因分析:检测时标本稀释池内没有或只有少量的FFS染料,可能是:①FFs染料试剂用完;②FFs染料试剂通入标本稀释池的通道口有堵塞。

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